久久五月中文字幕一区二区三区-亚洲欧美日韩精品综合在线观看-国产精品日韩在线亚洲一区-亚洲av自偷自拍亚洲一区

T33-22A 小鼠雜交瘤細胞簡介

起源與背景

細胞特性

1. 生長特性
   • 永生性：繼承骨髓瘤細胞的無限增殖能力，可在體外培養(yǎng)基中持續(xù)傳代培養(yǎng)，適合大規(guī)模生產單克隆抗體。
   • 貼壁或懸浮生長：雜交瘤細胞的生長方式因克隆而異，部分呈懸浮生長（類似淋巴細胞），部分可能輕微貼壁，需根據具體培養(yǎng)條件優(yōu)化。
   • 營養(yǎng)需求：通常需在含胎牛血清（FBS）的培養(yǎng)基中培養(yǎng)（如 RPMI 1640 或 DMEM），并添加抗生素（如青霉素、鏈霉素）防止污染。部分細胞可能依賴特定添加劑（如次黃嘌呤 - 氨基蝶呤 - 胸腺嘧啶核苷，HAT）以篩選雜交瘤細胞。
2. 功能特性
   • 單克隆抗體分泌：T33-22A 細胞可穩(wěn)定分泌針對特定抗原的單克隆抗體，其抗原特異性取決于融合前免疫小鼠所使用的抗原（如腫瘤相關抗原、細胞因子等）。
   • 純度與均一性：雜交瘤細胞經過克隆化篩選（如有限稀釋法），確保單一細胞來源，因此分泌的抗體具有高度均一的抗原結合位點和生物學活性。

培養(yǎng)與保存

1. 培養(yǎng)條件
   • 溫度與氣體環(huán)境：37℃恒溫培養(yǎng)箱，含 5% CO?的濕潤環(huán)境，維持培養(yǎng)基 pH 穩(wěn)定。
   • 傳代策略：當細胞密度達到 80%~90% 時需傳代，避免過度生長導致細胞凋亡或抗體分泌能力下降。傳代比例通常為 1:3~1:5，具體需根據細胞生長速度調整。
   • 污染監(jiān)測：定期觀察細胞形態(tài)（如是否出現(xiàn)懸浮死細胞增多、培養(yǎng)基渾濁），并通過支原體檢測等手段確保無菌狀態(tài)。
2. 凍存與復蘇
   • 凍存方法：對數(shù)生長期細胞經胰酶消化（若貼壁）或離心收集后，用含 10% DMSO、20% FBS 的培養(yǎng)基重懸，按每管 1×10?~5×10?細胞分裝，程序降溫后液氮保存。
   • 復蘇要點：快速解凍（37℃水浴），輕柔離心去除凍存液，避免 DMSO 對細胞的毒性，及時更換新鮮培養(yǎng)基。

應用領域

1. 單克隆抗體制備
   T33-22A 細胞的核心應用是生產單克隆抗體，可用于：
   • 基礎研究：如抗原 - 抗體相互作用機制、細胞信號通路研究。
   • 診斷試劑開發(fā)：作為 ELISA、免疫組化（IHC）、流式細胞術（FACS）等檢測方法的特異性抗體來源。
   • 靶向治療研究：若抗體針對腫瘤抗原，可進一步改造為治療性抗體（如 ADC 藥物、免疫毒素等）。
2. 免疫相關研究
   利用其分泌的抗體可探究免疫系統(tǒng)對特定抗原的應答機制，或用于中和實驗（如阻斷細胞因子活性）。
3. 生物制藥與工業(yè)生產
   通過大規(guī)模培養(yǎng)（如生物反應器）或小鼠腹腔注射制備腹水，實現(xiàn)單克隆抗體的批量生產，為臨床前研究或工業(yè)級試劑提供原料。

注意事項

• 特性穩(wěn)定性：長期傳代可能導致細胞突變或抗體分泌能力下降，建議定期克隆化篩選或從液氮凍存管中復蘇早期代數(shù)細胞。
• 種屬特異性：作為小鼠來源細胞系，其分泌的抗體為鼠源單克隆抗體，用于人體研究時可能引發(fā)免疫原性，需通過人源化改造降低異源性。
• 實驗倫理：涉及動物來源細胞的研究需遵循實驗動物倫理規(guī)范，尤其在體內成瘤實驗中需評估動物福利。